内容简介:
《基因操作技术》是为高职高专院校生物技术类专业编写的专业课教材，系统而简洁地介绍了基因操作技术的基本原理、基本操作和实际应用。
《基因操作技术》共分为7个项目，内容包括基因与基因组、基因操作的基本过程、核酸的分离纯化技术、目的基因克隆技术、DNA体外重组技术、目的基因的表达与鉴定、生物信息技术。每个项目配有技能目标、实训、项目小结、复习思考题，以便学生更好地学习和掌握有关技能。《基因操作技术》兼顾理论和应用，内容丰富，深入浅出，图文并茂，旨在培养学生应用知识的能力和实际操作的能力。
《基因操作技术》可供生物技术、生物工程、制药工程等生物类专业作为教材使用，亦可供相关技术人员参考。目录:
项目1基因与基因组
任务1.1核酸的结构与功能
1.1.1核酸的化学结构
1.1.2DNA的结构与功能
1.1.3RNA的结构与功能
1.1.4核酸的理化性质
任务1.2基因与基因组
1.2.1基因概念的发展
1.2.2基因的结构特征
1.2.3染色体
1.2.4基因组
任务1.3遗传信息的传递
1.3.1复喇
1.3.2转录
1.3.3翻译
任务1.4基因表达调控原理
1.4.1原核生物基因表达调控机制
1.4.2真核生物基因表达调控机制
项目小结
复习思考题项目2基因操作的基本过程
任务2.1基因操作的基本概念
任务2.2基因操作的基本过程
项目小结
复习思考题项目3核酸的分离纯化技术
任务3.1基因组DNA的分离纯化
3.1.1植物组织基因组DNA的提取
3.1.2动物组织及血液中基因组DNA的提取
3.1.3线粒体DNA的提取：碱变性法提取线粒体DNA
3.1.4细菌基因组DNA的制备：SDS法提取细菌总DNA
3.1.5病毒DNA的制备
3.1.6质粒DNA的分离纯化
实训1碱裂解法制备小量细菌质粒DNA
任务3.2RNA的分离纯化
3.2.1总RNA的分离纯化
3.2.2mRNA的分离纯化：oligo(dT)纤维素拄法
任务3.3核酸的检测与保存
3.3.1紫外分光光度法
实训2紫外分光光度法测定核酸含量
3.3.2凝胶电泳法
实训3琼脂糖凝胶电泳检测DNA
3.3.3核酸的保存
项目小结
复习思考题项月4目的基因克隆技术
任务4.1目的基因的扩增
4.1.1PCR基本原理
4.1.2PCR反应体系与编程
4.1.3引物设计
4.1.4常用PCR技术类型
实训4PCR扩增目的基因
任务4.2载体及其改造
4.2.1常用载体
4.2.2常用工具酶
实训5质粒DNA的酶切
实训6琼脂糖凝胶中回收DNA片段
项目小结
复习思考题项目5DNA体外重组技术
任务5.1重组DNA的构建
5.1.1相同黏性末端的连接
5.1.2平末端的连接
5.1.3不同黏性末端的连接
5.1.4人工黏性末端的连接
5.1.5人工接头法连接
5.1.6T/A克隆连接
5.1.7重组DNA构建应注意的事项
实训7DNA片段连接
任务5.2重组DNA的转化
5.2.1重组质粒转化大肠杆菌
5.2.2重组DNA转染真核细胞
实训8大肠杆菌感受态细胞的制备
实训9重组质粒的转化
任务5.3重组子的筛选与鉴定
5.3.1遗传学检测法
5.3.2物理检测法
5.3.3核酸分子杂交检测法
5.3.4免疫学检测法
5.3.5核酸序列分析法
实训10转化子筛选与鉴定
项目小结
复习思考题项目6目的基因的表达与鉴定
任务6.1目的基因的表达
6.1.1目的基因在原核系统中的表达
6.1.2目的基因在真核系统中的裹达
实训11目的基因在大肠杆菌中的诱导表达
任务6.2目的蛋白的鉴定
6.2.1SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳
6.2.2Western杂交
6.2.3等电聚焦电泳
6.2.4双向电泳
实训12SDS-PAGE检测表达蛋白质
项目小结
复习思考题项目7生物信息技术
任务7.1生物信息学概念
任务7.2生物信息数据库
7.2.1基因和基因组数据库
7.2.2蛋白质数据库
任务7.3数据的查询与提交
7.3.1数据查询
7.3.2向Genbank提交序列敷据
7.3.3序列文件格式
任务7.4序列比对与数据库搜索
7.4.1序列两两比对
7.4.2多序列比对
7.4.3数据库搜索
項目小结
复习思考题
附录
参考文献
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